Botox-Chargentest mittels Zell-Assay
Regulatorisch akzeptiert UnternehmenNovember 2012
Allergan Inc., Irvine, USA
Botulinum Neurotoxin Serotyp A (BoNT/A), meist als Botox bezeichnet, ist ein wirksames Therapeutikum, das zur Behandlung verschiedener Erkrankungen eingesetzt wird. Es hemmt die Signalübertragung von Nervenzellen, was zu einer Lähmung des Muskels führt. Diese Wirkung wird bei der Behandlung von Schielen, Schiefhals, Hyperhidrose oder Blasenfunktionsstörungen eingesetzt, aber auch zu ästhetischen Zwecken wie der Entspannung der Gesichtsmuskeln, was zur Faltenglättung führt. Bisher wurde und wird die Toxinkonzentration jeder Charge im Tierversuch bestimmt. Im sogenannten LD50-Test wird die Konzentration ermittelt, bei der 50 % der Mäuse einer Gruppe sterben. Hier wird eine tierversuchsfreie Methode vorgestellt. BoNT hemmt die vesikuläre Neurotransmitter-Exozytose durch Spaltung des Proteins SNAP25. Die einzelnen Schlüsselschritte dieser Reaktion können mit CBPAs (zellbasierten Wirksamkeitsassays) gemessen werden. Hier werden differenzierte menschliche Neuroblastomzellen (SiMa) und ein Sandwich-ELISA verwendet, der den BoNT/A-abhängigen intrazellulären Anstieg von gespaltenem SNAP25 misst. Allergan hat diesen Test für seine Produkte in den USA, Kanada und der EU validiert und damit den LD50-Test für die Chargenprüfung ersetzt.
Botulinum neurotoxin serotype a specific cell-based potency assay to replace the mouse bioassay
Ester Fernández-Salas
Eingestellt am: 31.08.2021
[1] https://journals.plos.org/plosone/article/comments?id=10.1371/journal.pone.0049516
