Non Animal Testing Database
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Screening-Plattfrom zur Bestimmung der Zytotoxizität von Killerzellen

2016
Karolinska Institutet, Tumor and Cell Biology, Stockholm, Schweden(1)
KTH – Royal Institute of Technology, Solna, Schweden(2)
Zytotoxische Effektor-Lymphozyten, wie z.B. natürliche Killerzellen (NK) und T-Zellen, sind wichtig für die Immunabwehr gegen Krebs und Virusinfektionen, was eine entscheidende Eigenschaft in der adoptiven Zelltherapie ist. Diese Screening-Plattform kann zur Bewertung des zytotoxischen Potenzials einzelner natürlicher Killerzellen (NK-Zellen) innerhalb größerer Populationen verwendet werden. Humane primäre NK-Zellen wurden über einen Silizium-Glas-Mikrochip verteilt, der eine hohe Anzahl von individuellen Mikrovertiefungen enthält, die mit Zielzellen beladen sind. Durch Fluoreszenz-Screening und automatisierte Bildanalyse konnte die Anzahl der NK und der lebenden oder toten Zielzellen in jeder Vertiefung zu verschiedenen Zeitpunkten nach initialer Vermischung bestimmt werden. Die Zytotoxizität wurde auch durch Zeitraffer-Lebendzell-Bildgebung in Mikrovertiefungen untersucht, um das Tötungspotenzial einzelner NK-Zellen zu quantifizieren. Darüber hinaus wurde der Screening-Ansatz angepasst, um seriell abtötende NK-Zellen zu finden und zu bewerten. Dieser Ansatz könnte in der Klinik Anwendung finden, z.B. bei der Auswahl von Spendern für die Stammzelltransplantation oder bei der Generierung hochspezifischer und zytotoxischer Zellen für die adoptive Immuntherapie.
Microchip screening platform for single cell assessment of NK cell cytotoxicity
Björn Önfelt(1, 2)
#164
Eingestellt am: 27.05.2020
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