Protokoll zur Isolierung und Analyse von Zellen aus menschlichen Gehirnen
2015
Ruhr-Universität Bochum, Bochum, Deutschland
Mit der zunehmenden Alterung der Weltbevölkerung wächst das Interesse an der Erforschung des Gehirns im Zusammenhang mit normaler Alterung und neurologischen Erkrankungen. Trotz der Fortschritte auf diesem Gebiet gibt es jedoch mehrere Einschränkungen bei der Untersuchung bestimmter Zelltypen auf molekularer Ebene. Mit den derzeitigen Isolierungsverfahren ist es nicht möglich, einzelne intakte Neuronen zu untersuchen. Die jüngsten Aktualisierungen der Lasermikrodissektionstechniken sind attraktiv, um die derzeitigen Einschränkungen bei der Isolierung von Gehirnzellen zu überwinden. In dieser Studie wird ein detailliertes Protokoll zur Isolierung und Analyse von Neuronen aus menschlichem postmortem Gehirn definiert. Die Ergebnisse zeigen, dass dieser Arbeitsablauf das erfolgreiche Einfrieren, Schneiden und Färben von menschlichem Gewebe für die Lasermikrodissektion ermöglicht, was durch Massenspektrometrie validiert wurde. Die in dieser Studie angewandte Probenvorbereitung ist auch für andere Analysetechniken geeignet. Insgesamt wird hier ein Protokoll vorgestellt, das die Isolierung menschlicher Gehirnzellen ermöglicht, was ein leistungsfähiges Instrument zur Untersuchung spezifischer Funktionen und molekularer Mechanismen von Gehirnzellen sein könnte.
Enrichment of single neurons and defined brain regions from human brain tissue samples for subsequent proteome analysis
Katrin Marcus, Caroline May
Eingestellt am: 04.09.2021
[1] https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00702-015-1414-4[2] https://data.jrc.ec.europa.eu/dataset/a8fd26ef-b113-47ab-92ba-fd2be449c7eb
