iGIST – ein kinetischer Bioassay für Pertussis-Toxin
November 2020
University of Turku, Turku, Finnland
Der Nachweis der Pertussis-Toxin (PTX)-Aktivität ist für die Entwicklung und Herstellung von Pertussis-Impfstoffen von entscheidender Bedeutung. Hier beschreiben die Forscher die Interferenz in der Gαi-vermittelten Signaltransduktion (iGIST), einen tierfreien kinetischen Bioassay zum Nachweis von PTX, indem sie seine Wirkung auf die Signalübertragung des inhibitorischen G-Protein-gekoppelten Rezeptors (GPCR) messen. iGIST basiert auf HEK293-Zellen und einer lumineszierenden 3'5'-cyclischen Adenosinmonophosphat (cAMP)-Sonde. iGIST hat eine niedrige Empfindlichkeitsschwelle im pg/ml-Bereich von PTX, die in einer parallelen Analyse über die derzeit verwendete In-vitro-Endpunkttechnik zum Nachweis von PTX um das 100-fache übertroffen wird. iGIST erkennt PTX auch in komplexen Proben, d. h. einem kommerziellen PTX-Toxoid-haltigen Pertussis-Impfstoff, der mit aktivem PTX versetzt wurde. iGIST hat eine objektive digitale Anzeige und ist beobachterunabhängig, was Möglichkeiten zur Automatisierung bietet. iGIST erweist sich als vielversprechende Methode zum Nachweis von PTX-Aktivität bei der Entwicklung und Herstellung von Keuchhusten-Impfstoffen.
iGIST— a kinetic bioassay for pertussis toxin based on its effect on inhibitory GPCR signaling
Arto T. Pulliainen
Eingestellt am: 26.10.2022
[1] https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acssensors.0c01340
